产品货号：
RFT391
中文名称：
10×Tris-甘氨酸转膜缓冲液(湿转)
英文名称：
产品规格：
500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
10×Tris-甘氨酸转膜缓冲液(湿转)可以用于Western时湿转转膜，含250mM Tris、1.92M glycine，pH约为8.3。为方便客户使用，10×转膜缓冲液中没有添加甲醇和SDS，客户根据需要配制1×转膜缓冲液时自行添加。
| 组分 | 规格 |
| 10×Tris-甘氨酸转膜缓冲液(湿转) | 500mL |
| 说明书 | 1份 |
保存：室温，有效期1年。
1×即用型转膜缓冲液配制方法：
| 1×即用型转膜缓冲液配制量1升 | |||
| 10×Tris-甘氨酸转膜缓冲液 | 100mL | ||
| 变性蛋白 | 非变性蛋白 | ||
| ＜20kD蛋白 | 无水甲醇 | 20% | 5～10% |
| SDS | 0.01% | 0.01% | |
| 20～80kD蛋白 | 无水甲醇 | 10% | 0～5% |
| SDS | 0.05% | 0.05% | |
| ＞80kD蛋白 | 无水甲醇 | 10%（NC膜） 0～5%（PVDF膜） | 0% |
| SDS | 0.1% | 0.1% | |
| 超纯水 | 定容至1升，不要调节pH，pH~8.3 | ||
- 1×即用型转膜缓冲液建议现用现配，不建议保存。
- 甲醇和SDS在转膜中有拮抗作用。甲醇使蛋白更加结合在胶上，而SDS让蛋白更加离开胶。因此对大蛋白转膜来说，多加SDS，少加甲醇；而对小蛋白转膜，多加甲醇，少加SDS。
- 膜的选择：转膜可以选择PVDF膜或NC膜。根据蛋白大小选择膜的孔径。一般说来，大于20kD蛋白选择0.45μm孔径，低于20kD选择0.22μm孔径。PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿活化。
- 三明治结构：转膜三明治结构与传统转膜相同，即根据“黑胶白膜/黑胶红膜”制作三明治，即膜置于转膜夹芯正极一侧，凝胶置于转膜夹芯负极一侧，这样凝胶上带负电荷的蛋白才能转移到膜上。
蛋白转膜三明治制作：
负极（电转夹黑色面）-海绵垫-1层1mm厚度滤纸凝胶-膜-1层1mm厚度滤纸-海绵垫-正极（电转夹白色面） - 转膜条件：
以下转膜条件仅供参考，客户针对自己的目的蛋白，最好经过1～2次预实验后，确定最佳的转膜条件。膜孔径 蛋白大小 稳流 建议时间 降温措施 0.22μm ＜20kD 200 mA ~30分钟 不需要 0.45μm 20～50kD 300 mA ~45分钟 需要 0.45μm 50～200kD 350 mA ~50分钟 需要 0.45μm ＞200kD 350 mA ~2.5～4.5小时 需要
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